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电泳仪的研发背景与使用技巧

发布时间:2018-06-01 阅读:168

电泳仪的应用虽广泛,但是有不少用户对其了解甚少,以下内容主要从电泳仪的研发背景与使用技巧开始介绍,助大家对其有个深入的了解!
一、电泳仪的研发背景
1937年,瑞典生化学家Tiselius集前人百余年探索电泳现象之大成,发明了Tiselius电泳仪,在此基础上建立了研究蛋白质的自由界面电泳方法,利用该法首次证明人血清是由白蛋白(A)、α、β、γ球蛋白组成,并因此于1948年获得阿果奖。随后电泳技术的发展突飞猛进,1949年,RicketlsMarrack等人证明人血清蛋白质经电泳分离可依次分为白蛋白,α1、α2、β、γ球蛋白五个组分,1957年Reiner对人血清五个组分蛋白进行了定量分析。
但自由界面电泳没有固定支持介质,扩散和对流作用较强,影响分离效果,于是在50年代相继出现了固相支持介质电泳。最初的支持介质是滤纸和醋酸纤维素膜,目前这些介质在实验室已经应用较少。在很长一段时间里,小分子物质如氨基酸、多肽、糖等通常用滤纸、纤维素或硅胶薄层平板作为介质进行电泳分离、分析,但目前一般使用灵敏度更高的技术如高效液相色谱法(HPLC)等来进行分析。而对于复杂的生物大分子,以滤纸、硅胶或醋酸纤维素膜等作为支持介质进行电泳,其分离效果并不理想。于是1959年,Raymond和Weintraub,Davis和Ornstein先后利用人工合成凝胶作支持介质建立了聚丙烯酰胺凝胶电泳,从而大大提高了电泳的分辨率和分离效果,增强了电泳技术的发展、渗透及与其他技术结合配套的能力。致使各式各样的电泳技术和电泳材料如雨后春笋、竞相争荣,成为当代实验科学技术中品种繁多、应用广泛、基础与尖端技术皆备的大技术。
一、电泳仪的使用技巧
1、电泳仪通电进入工作状态后,禁止人体接触电极、电泳仪电泳物及其它可能带电部分,也不能到电泳仪电泳槽内取放东西,如需要应先断电,以免触电。同时要求电泳仪必须有良好接地端,以防漏电。
2、电泳仪通电后,不要临时增加或拨除输出导线插头,以防短路现象发生,虽然电泳仪内部附设有保险丝,但短路现象仍有可能导致电泳仪损坏。
3、由于电泳仪不同介质支持物的电阻值不同,电泳仪电泳时所通过的电流量也不同,其电泳仪泳动速度及泳至终点所需时间也不同,故电泳仪不同介质支持物的电泳不要同时在同一电泳仪上进行。
4、在总电流不超过电泳仪额定电流时(最大电流范围),可以多槽关联使用,但要注意不能超载,否则容易影响电泳仪寿命。
5、参照实验要求选择相应规格型号的电泳仪,才能确保经济、耐用、简单、合理。因为高、低压电泳仪内部结构特征不同,由于高压电泳仪常附加有多项功能,而且高压电泳仪绝不能空载运行(容易造成人身伤害、内部器件损坏),导致操作上难易程度的不同等。因此正确的选购方法是:“根据实验要求的最高电压,确定购买电泳仪的规格及型号”。
6、某些特殊情况下需检查电泳仪电泳输入情况时,允许在稳压状态下空载开机,但在稳流状态下必须先接好负载再开机,否则电压表指针将大幅度跳动,容易造成不必要的人为电泳仪损坏。
7、使用过程中发现电泳仪异常现象,如较大噪音、放电或异常气味,须立即切断电泳仪电源,进行检修,以免发生意外事故。
8、电泳仪是精密仪器,在操作过程中要严格遵守操作规程,但不可避免会出现各种各样的故障,当仪器提示有故障时,应立即处理。
9、如果电泳仪的输出电压U达不到预置值,应首先观察I或P是否已经恒定,或者已经达到电泳仪所规定的最大I或P(JY电泳仪均有明确指示灯标志)。如果尚未达到极限值,将已经恒定I或P的设置调大(有必要的话至极限值),才能够提高电压输出。

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